黑色素瘤是源于皮肤、粘膜、眼和中枢神经系统色素沉着区域的黑素细胞的恶性肿瘤。66%恶性黑色素瘤可见原癌基因B-raf突变。已有研究证实，斑马鱼神经嵴细胞突变的B-raf基因激活，可引发一系列特定的早期转录事件；斑马鱼神经嵴细胞B-raf基因突变和P53基因敲除可致神经嵴前体细胞终末分化受阻，从而促进黑色素瘤的发生。

    美国东安格利亚大学和波士顿儿童医院的研究人员进行了一项突破性研究，通过巧妙设计的实验，他们发现，通常用于治疗类风湿关节炎的药物来氟米特也可抑制恶性黑色素瘤的生长，为该致命性癌症的治疗提供了一种有效新疗法。

本研究的目的是：

分析突变B-raf基因激活引发的早期转录事件在黑色素瘤发生的作用； 筛查并确定针对早期转录事件的小分子抑制剂，观察其对神经嵴前体细胞发育、分化的逆转作用； 观察特定小分子抑制剂的抗肿瘤（黑色素瘤）效应。

    研究设计思路（hypothesis）如下：

    一、黑色素瘤来源于神经嵴细胞，Tg(mitfa: BRAF(V600E))plus P53-/-可导致细胞癌变（黑色素瘤）。

建立斑马鱼WT、P53-/-、Tg(mitfa: BRAF(V600E))、P53-/- plus Tg(mitfa: BRAF(V600E))模型，观察神经嵴前体细胞向黑色素细胞的发育。 与正常对照比较，分析基因表达的改变（gene set enrichment analysis）。 原位杂交定位crestin的表达组织细胞（crestin是神经嵴前体细胞的标识）。

    二、神经嵴前体细胞抑制剂可能具有抑瘤（黑色素瘤）效应。

筛选2000种化合物，观察其对斑马鱼卵发育过程中crestin+细胞增殖、分布的影响，包括抑制效应和毒性。 确定强效且低毒的化合物，并作相关结构分析，分析其所属种类。 观察兴趣化合物在斑马鱼发育过程中，对crestin+神经嵴前体细胞分化的影响。 体外观察兴趣化合物对神经嵴干细胞分化和自我更新的抑制作用。 观察兴趣化合物在体外和体内抑制人黑色素瘤的效应。 分析兴趣化合物可能的药理机制（基因水平分析）。

    通过上述研究设计和假设，研究者首先证实，抑制神经嵴细胞的分化发育可以阻断/抑制黑色素瘤的发生。通过药物筛查，研究者发现来氟米特可有效抑制神经嵴前体细胞向黑色素瘤细胞的发育。基于上述实验结果，研究者又设计了体内和体外实验，证实来氟米特能够抑制多种人黑色素瘤的生长；在荷瘤小鼠体内，来氟米特具有抗黑色素瘤的作用，与另一种正在研发的抗黑色素瘤药物联用，抗肿瘤效应更强。（编译：刘荣军）

参考文献：《Nature》2011;471:518-522