日本国立神经病学和精神病学中心的Komaki等人开展了一项开放性、剂量递增的1期临床试验，以验证NS-065 / NCNP-01的安全性、药代动力学和活性；结果表明，NS-065/NCNP-01具有良好的安全性和药代动力学。

杜氏肌营养不良（duchenne muscle dystrophy，DMD）是一种致死性X连锁隐性遗传病，根据美国俄亥俄州和英国威尔士新生儿筛查项目的结果，该病大约影响1/5000的活产男婴。该疾病的表现包括进行性肌无力、心肌病和呼吸衰竭，这些均可导致早亡。DMD是由肌营养不良蛋白（dystrophin）（一种大的结构性肌肉蛋白）异常引起的。编码肌营养不良蛋白的基因突变可导致肌膜稳定性降低，细胞外钙离子流入增加，并最终导致肌纤维退化。反义寡核苷酸（antisense oligonucleotides，ASOs）可以在突变的肌营养不良蛋白转录本中诱导外显子跳读，通过剪接前体mRNA中与缺失区域相邻的外显子来纠正其开放阅读框。动物模型研究表明，ASO可以恢复功能性肌营养不良蛋白的表达并抑制疾病进展。

营养不良蛋白基第45号～55号外显子区域是缺失突变热点，是外显子跳读的潜在靶点。第51号外显子的跳跃在理论上可以治疗13%的DMD患者，第53号外显子的跳读有望治疗大约8%～10%的DMD患者。一种有效的第53号外显子跳读药物可以使一些DMD患者受益。

NS-065/NCNP-01是一种通过综合序列优化开发的吗啉ASO，可有效诱导人横纹肌肉瘤细胞系中编码肌营养不良蛋白的前体mRNA的第53号外显子跳读，并可在携带不同突变的两名DMD患者的MyoD转导成纤维细胞中诱导外显子跳读。NS-065/NCNP-01治疗可恢复肌营养不良蛋白的表达。

在这些关键的初步结果的基础上，日本研究人员启动了1期临床研究。该研究纳入了10名携带肌营养不良蛋白基因突变（其阅读框可以通过第53号外显子跳读恢复）的DMD患者（6至16岁），以1.25mg/kg/周、5mg/kg/周或20mg/kg/周的剂量给予NS-065/NCNP-01，给药时间持续12周。研究的主要终点是安全性；次要终点是药代动力学和有效的外显子跳读。在治疗前和治疗后分别采集肌肉活检样本，并通过逆转录聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR）、免疫荧光、蛋白质印迹等方法评估第53号外显子跳读和肌营养不良蛋白表达量。

治疗未中断且治疗期间没有严重的药物不良反应。NS-065 / NCNP-01以剂量依赖性方式诱导编码肌营养不良蛋白的mRNA的第53号外显子跳读，且10例患者中有7例出现肌营养不良蛋白/收缩蛋白比值升高。此外，外显子跳读量与最大血药浓度及血浆浓度-时间曲线下面积相关。

该研究是吗啉ASO——NS-065 / NCNP-01的首次人体临床试验。研究表明，该药物在10例DMD患者中具有良好的安全性，且可诱导第53号外显子跳读，从而恢复开放阅读框，并显示出良好的药代动力学特性，值得在2期临床试验中进一步研究。（作者：贾盛崧)

参考文献：Science Translational Medicine 2018;10: eaan0713